從樣品中提取你的靶蛋白

蛋白分析的第一步是蛋白提取，這就需要釋放不同來源樣品中的蛋白質。無論通過機械處理還是基于去垢劑的提取方法，都會不可避免地破壞細胞穩態，導致蛋白降解或不穩定。因此，提取過程中蛋白的完整性直接決定了下游蛋白樣品分析所得數據的質量。例如，某些提取方法可能在細胞裂解和細胞內含物的溶解方面有效，但可能會導致蛋白變性，影響天然蛋白相互作用的檢測和分析。

樣品類型

培養的哺乳動物細胞，哺乳動物組織和原代細胞是生理相關的內源性蛋白（包括翻譯后修飾）研究，以及過表達系統（瞬時或穩態）的常見樣品來源。當提取哺乳動物組織中的蛋白質時，需要一些溫和的酶或機械破碎手段來幫助從較復雜組織基質中分離細胞。對于僅通過質膜將細胞內容物與環境隔離開的培養哺乳動物細胞和原代細胞來說，試劑中的去垢劑可打破蛋白-脂質膜雙層結構，使總蛋白提取更為容易。通常所研究的或用于重組蛋白表達系統的其他生物體包括細菌、酵母和植物。這些細胞類型含有細胞壁，需要額外使用酶解或機械破碎的方法才能有效釋放蛋白。然而，目前已開發出基于去垢劑的解決方案，可有效提取和溶解這些細胞中的蛋白，而無需機械外力破壞。該方法對于處理更多樣品數量或使用自動提取和純化方案來說尤其重要。

蛋白提取適用于 各種動物、植物細胞和組織及細菌、真菌、酵母等樣本。

亞細胞分級分離

對于大多數研究來說，只需直接制備全細胞裂解物以獲取可溶蛋白樣品，用于下游直接檢測或進一步純化與分離。但是，如果在蛋白提取之前將細胞分為不同的區室或細胞器，可以顯著提高特定蛋白的產量或富集率。機械裂解通常會破壞所有細胞區室，使分離特定細胞組分變得更加困難。但是，通過謹慎優化試劑，已開發出基于逐級差異去垢劑的方法來分離核蛋白、胞質蛋白和膜蛋白組分。該方法可以將疏水性膜蛋白溶解，使其與親水蛋白分離，并且可以分離完整細胞核、線粒體和其他細胞器，用于直接研究或分步提取蛋白。

針對細胞核、胞質、線粒體、溶酶體、高爾基體、內質網、外泌體等細胞不同部位的細胞器分離試劑盒。