細胞活性檢測概述

細胞活性是指樣本中健康的活細胞數量。細胞活性檢測用于測量細胞響應胞外刺激、化學試劑或療法處理的物理和生理健康情況,或者用于確定細胞培養的最佳生長條件。

細胞活力選擇指南


膜完整性活性染料(核酸染料)

膜完整性是細胞活性檢測中的常用檢測指標。膜完整性染料不會透過細胞,只能通過受損的細胞膜進入細胞。該染料不能穿透活細胞未受損的質膜。膜完整性活性染料包括:

PI 和 7-AAD

PI 和  7-AAD 是流式細胞儀常用的具有代表性的 DNA 結合染料;然而,兩者也可用于熒光顯微鏡。

PI是一種核酸和染色質染料,常用于檢測死細胞。在水溶液中,PI的激發/發射光譜為493/636 nm;但是結合DNA后,其熒光會提高20-30倍,激發/發射光譜值在535/617 nm。這種染料通常與凋亡檢測染料(如annexin V)聯合使用;更多信息見以下細胞活性檢測試劑盒一節。加入 RNase 后,PI 還可用于固定細胞的 DNA 含量檢測,進行細胞周期分析

7-AAD也是一種核酸和染色質染料,在結合DNA后發生光譜變化。它能選擇性結合DNA的GC區域,顯現出獨特的帶型,以進行染色體帶型研究。7-AAD也能用于流式細胞周期分析中,適用于已固定和破膜的細胞。

膜完整性活性染料(氨基染料)

氨基反應性活性染料為非細胞通透性,并可與細胞的氨基蛋白發生反應。在活細胞中,這些染料與細胞外的伯胺結合,并發出微弱的熒光;在死細胞中,這些染料與細胞內的氨基蛋白結合,使得細胞熒光顯著增強。由于染料是與細胞蛋白共價結合,樣本可被固定和透化,而不會失去其活性染色模式。


酶活性底物

酶活性底物是一種不自發熒光的熒光試劑,可與活細胞中的細胞酶或受損細胞釋放的細胞酶反應而發出熒光或顯色。

Calcein AM 染料是細胞通透性底物,用于鑒別活細胞。這些底物可測量酶活性和膜完整性。活細胞的酶活性使酯酶能夠切割 AM 基團,并產生熒光,而活細胞的完整細胞膜是細胞內保留熒光染料的必需條件。


細胞活性檢測產品